兩個蛋白之間相互作用的常用分子生物學技術?

時間 2021-05-11 17:24:51

1樓:PeterWang

比較新的技術是mst(nanotemper公司),在眾多檢測手段中(itc,biacore,native-page等),用量很少。

2樓:趙pooh

免疫共沉澱,做起來比較簡單

GST pull down,做起來有點難

免疫螢光共定位,比較主觀

才疏學淺,一下子能想到的就這些了。

3樓:

如果你手上有比較大量的純度比較高的蛋白質的話。可以嘗試用以下比較直接的方法:

1. isothermal titration calorimetry (ITC),直接測定兩個蛋白互相作用的Kd值。

2. AUC,也就是超速離心分析。可以直接測定兩個蛋白相互作用與否。

3.SAXS, 也就是X-ray小角散亂。不過技術難度比較大一些。

4. 溶液NMR,這個應該可以但不太了解。

5. 結晶再解構,這個不用解釋了。比較究極一點。

6.cryo-EM,同上。比較究級的方法。

7. 最簡單常用的,gel-filtration,觀察有沒有oligomer的分子量峰出現。但是相互作用弱的話很難觀測到。

8.更簡單常用的nativePAGE,同上,相互作用弱則很難觀測到。

9.用氨基架橋試劑共價連線,然後SDS-PAGE。看看有沒有oligomer的帶。

暫時想到這些,跨度比較大。

4樓:史寒朵

我是來放 review 的

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