1樓：麥田
試劑甲中的銅離子破壞了蛋白質的次級鍵，使蛋白質結構鬆散，顯色基團更多的暴露，增加試劑乙結合程度，提高第二步反應的靈敏度。所以，即使有少量的蛋白質也會有明顯的顯色反應。
2樓：學會再見
因為鹼性銅試劑起到了定性的作用。
磷鎢酸和磷鉬酸鹽有很強的氧化還原能力，能夠把勺子氧化成藍色。
加入鹼性銅試劑，相當於進行了一次雙縮脲反應，證明後面和磷鎢酸、磷鉬酸鹽反應的是蛋白質，後面的定量分析才有意義。
現在更多地使用考馬斯亮藍法，就是因為考馬斯亮藍G250比磷鎢酸、磷鉬酸鹽要穩定，不容易受干擾（所以操作也更簡單），靈敏度是酚試劑法的四倍。
3樓：餘新波
Folin-酚試劑法又名Folin -Lowry酚試劑法,是雙縮脲法的發展,Folin -酚試劑由甲、乙兩部分試劑組成,甲試劑使蛋白質中的肽鍵在鹼性條件下與鹼性銅試劑中的Cu2+作用生成蛋白質-Cu2+複合物,即生成紫紅色絡合物,相當於雙縮脲反應。乙試劑在鹼性條件下,試劑中的磷鉬酸一磷鎢酸被蛋白質-Cu2+複合物中所含的酪氨酸和色氨酸殘基還原,生成藍色物質。
此法的顯色原理與雙縮脲法是相同的，只是加入了第二種試劑，即Folin—酚試劑，以增加顯色量，從而提高了檢測蛋白質的靈敏度。
雙縮脲反應主要涉及肽鍵，可測定的範圍為1～10mg蛋白質，適於精度要求不太高的蛋白質含量的測定，能測出的蛋白質含量須在約0.5mg以上。加入了鹼性銅試劑後混合溶液並沒有發生顏色變化的原因可能是蛋白質含量太少，以至無法肉眼觀察到顏色變化。
Folin-酚法（Lowry法）過去是應用最廣泛的一種方法，但由於其試劑乙的配製較為困難，且費時較長，要精確控制操作時間，標準曲線也不是嚴格的直線形式，專一性較差，干擾物質較多。對雙縮脲反應發生干擾的離子，同樣容易干擾folin-酚反應（Lowry反應）。而且對後者的影響還要大得多。
酚類、檸檬酸、硫酸銨、Tris緩衝液、甘氨酸、醣類、甘油等均有干擾作用。
近年來逐漸被考馬斯亮蘭法所取代。
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