1樓：易基因ZXM
做個陰性對照，不加菌液的，先排除試劑及氣溶膠的汙染。
P出來的條帶大小與預期的是否一致？
酶切的酶是單一酶切位點嗎，又或者是某個位置突變了，正好突變成了酶切位點
直接送去測個序就知道了
2樓：葵花是個叒女子-c
1、首先要確定菌液PCR是否是你要的片段。
2、質粒酶切的酶切位點是否正確？
3、正常來講菌液PCR能P出來，但是測序測不出來也是比較常見的情況，跟你提質粒是否正確？PCR條帶是否一致？還有酶切位點擊擇是否正確有關。
3樓：生物小烏龜
菌液pcr能出來，說明目的基因已經轉殖到載體上。但是，酶切結果條帶不符，條帶是偏大還是偏小？假設偏小，那就考慮選擇的酶切位點是否合理，設計的酶切位點是乙個還是兩個，有沒有用primer5.
0對目的基因進行酶切位點的檢測，如果目的基因有這個位點，就不行；如果你根據載體設計，一般載體酶切位點只有乙個。因此，酶切位點需要重新考慮。同時還需考慮首末端是否正確，如其他回答的測序也有必要。
4樓：汪源
p出來，條帶大小對嗎？
就算條帶大小對，條帶亮度呢？
就算亮度對，有可能連反了呢？
bug太對，菌p只是手段縮小你工作的範圍，只有測序才是王道。
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