1樓：sunray
過程要快，全程在冰上，前兩天結束了trizol提取葉片rna的通過過程...恩，以失敗三次換回來的。具體方法優酷上找很多又詳細
2樓：氣度影響格局
知乎首答，RNA提取失敗原因太多，從取樣開始每一步都有降解的風險，結合我自身的經歷說幾點:1、研磨，研磨可以說是最最關鍵的一步，稍微慢一點，可能提取出來的rna質量會差很多，研磨不僅全程要保證液氮不能幹，還要保證速度，最後移樣時可以直接用離心管舀粉末；2、樣品太多同樣會導致裂解不充分，這點剛接觸該實驗的人可能不會太注意，寧缺毋濫，rna含量沒有那麼少，一般0.1克往上點就ok(我提的植物種皮，僅供參考)；3、速度，速度一定要快，多做幾次會好很多，還有實驗全程最好在低溫下進行。
至於樓主說的情況，你可以問問實驗室師兄師姐以前提的情況，首先要確定是否是樣品的問題。如果實驗室以前有人用CRAB法提出來過，那肯定是樓主哪一步出了問題。不行可以試試試劑盒，簡單快速。
最後關於rna酶的問題，最好去除，畢竟前人總結的經驗，但我有次直接用洗完的研缽研磨提的也不錯，外源性rna酶對rna的影響遠沒有內源性rna酶的影響大。深夜本來準備睡得:-( 看到個自己能答的忍不住鳥，比較籠統，有時間再修改修改哈哈！
3樓：伯伯的花房子
複雜樣品及大量提取不建議用trizol。多醣、多酚都會干擾。
可以用CTAB法，2%CTAB，2%PVP，2M NaCl，25mM EDTA，1%β-ME，65°C預熱，樣品液氮研磨後65°C 10min，氯仿異戊醇提兩次，異丙醇沉澱，得到DNA/RNA混合物，用DNase消化，或用氯化鋰沉出RNA（>200nt）
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