1樓：Organ
你所說的RACE技術應該指的是要獲取已知基因（只知道其中一小片段，但是這歌片段只在這個基因上有）的末端序列的方法。
首先，列一下我們在做RACE之前所擁有的資訊：total mRNA、已知基因的乙個小片段。
其次。表明一下我們的目的：想要通過這個已知片段以及total mRNA來獲取這個基因的末端資訊（因為一旦我們知道了末端資訊，我們就能夠通過設計引物，將這個基因從基因組上擴增出來，然後測序獲取全部資訊）。
那麼，我們有什麼辦法呢？
似乎3』末端比較好獲取一些，因為大多數mRNA 3』末端有ploy(A)，我們只需要做乙個oligo(dT)引物，以及已知片段的引物，就能將已知片段和ploy(A)之間的序列從mRNA反轉錄的cDNA上擴增出來（這裡提一下，反轉錄的cDNA可以直接得到我們想要基因的DNA，但是量很少，而且都是單鏈，很難去做後續實驗，因此我們需要擴增）。但是5』端咋整？
因此就有人想出了RACE。RACE的核心技術在於乙個特殊的反轉錄酶，以及mRNA 5』帽子中甲基化的G。
首先這個酶有什麼用？這個酶可以在以oligo dT為引物的反轉錄中，檢測到5』帽子中甲基化的G時，在末端加幾個C。這就是RACE利用的核心原理。
用別人的幾幅圖來輔助說明一下。
首先，加入oligo dT引物、這個特殊的酶、5』—GGG引物（模擬圖中）、totle mRNA。然後反應，到達5』末端時，檢測到「帽子」中的甲基化的G，在末端加CCC，然後5』—GGG引物結合CCC，轉化模版（以5』—GGG為模版）再加一段序列上去。這樣就可以得到完整的cDNA（5』末端還加了自己已知的序列，並且如圖右側分支所述，還排除掉了不完整的cDNA）。
到這裡，我們就獲得到了兩端序列都已知的total cDNA，就可以開心的去擴增了，想擴增多少擴增多少。
CE技術/10921805?fr=aladdin)能夠很好的解決你對書上「AP-ploy(A)是幹什麼用的疑惑。
有問題可以繼續追問，但是不一定及時看到。
2樓：吳青
可能你沒有搞明白隨機引物，接頭引物，polyT引物等的原理和作用，你搞清楚這幾個引物幹啥用就明白了。另外，理解RACE要分5』RACE和3『RACE兩種，分別學習原理和使用目的，你會更快搞明白。
3樓：leon
你提的RNA就是模板啊，模板本身就存在，只是我們不知道它的鹼基序列（未知序列），說是未知序列也不是完全未知，至少需要知道其中的一段序列（而不是全長）。
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