分光光度法測定蛋白質的濃度是紫外光下更準確還是可見光下更準確?

時間 2022-01-22 02:11:14

1樓:小鏟子

猜測你說的是測蛋白濃度的兩種方法吧,測定紫外280 nm和顯色法(不同種稱呼吧)例如,BCA法或者Bradford染色法測可見光處(一般560-590nm)下吸收值,這兩種辦法的準確度吧

先說結論,兩種方法都可以,但也都不準確,都存在誤差了解其原理就會相對來說好理解一些,測280nm下吸收峰是基於蛋白質中存在芳香族氨基酸,如苯丙氨酸,色氨酸,酪氨酸,這類氨基酸在280nm下有較強的吸收值。但是不同蛋白之間這些氨基酸的豐度不一樣,也就導致測出來的濃度不同,只能給乙個限定,定義1 Abs=1mg/mL這種。有助於他人重複及定量。

至於顯色法則原理也不盡相同,但是基本都是參照BSA蛋白作為標準品,然後繪製的標準曲線去計算出來,但是顯然BSA和你的蛋白肯定有差異,那麼在顯色反應上,反應的強度也就會不同,帶來不可避免地系統誤差。

但是沒有辦法,要對蛋白溶液的濃度進行定量,也只有這些方法,統一就好吧

2樓:hai li

是測280nm吸收得到蛋白質濃度所以是紫外

紫外可見分光光度法?

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