sds page電泳與常規page電泳區別有哪些?

時間 2021-06-02 03:30:33

1樓:

如樓上所說SDS是變性劑,加在PAGEgel裡面,會是蛋白質變性,從原本的3維構象變成線性結構,另外蛋白複合體也會分成單個蛋白。跑膠後,蛋白因為分子量不同而被分成不同的條帶。而page膠就是poly-acrylamide gel,相當於一種媒介支援,蛋白在裡面還是保持原本摺疊的結構,並且存在蛋白複合體中,蛋白的帶點亮液沒有被破壞,因此,在page膠裡,分離的是蛋白質複合體,結果往往是彌撒狀,而不是清晰的蛋白條帶。

2樓:徐馬蟻

分離蛋白質的時候用到SDS ,加入SDS後它會和蛋白質按4:1結合 ,這樣在跑電泳的時候遷移距離只和蛋白質分子量有關和電荷無關 。這樣更方便。

3樓:kym945

對樓上答案進行補充。

SDS作為一種離子型去垢劑,可以破壞蛋白中的非共價鍵,使蛋白質發生變性。並且其與蛋白形成的複合物帶有大量的負電荷,可以掩蓋蛋白本身帶有的電荷,使其在電泳時,蛋白在PAGE中行進速度的差異只由分子量的大小來決定。SDS-PAGE蛋白電泳就是以此來分離不同大小的蛋白。

既然有含有SDS的變性電泳,當然就有不含SDS的非變性電泳。比如你純化得到了一種蛋白,但是你不知道蛋白是以單體的形式存在還是通過非共價鍵形成了多聚體,這時就可以通過非變性電泳進行分離。此方法中,蛋白的行進速度由蛋白所帶的電荷和分子量兩種因素決定,故無法通過Marker來確定分子量的大小。

除此之外,還有還原電泳和非還原電泳。區別就是樣品的緩衝液中是否含DTT或beta巰基乙醇等強還原劑了,其作用就是開啟蛋白中的二硫鍵。

PAGE除了可以用於分離蛋白以外,還可用於分離核酸,其解析度要比瓊脂糖凝膠高。當然,染色方法自然也不是蛋白染色常用的考馬斯亮藍染色,而是一般用銀染。

4樓:野合菌

膠體一樣吧= =

PAGE就是polyacrylamide gelelectrophoresis

SDS主要可以進一步使蛋白質變性,所以一般用於蛋白質電泳。。。sds-page算是蛋白質電泳的標準方法吧,其他的gelelectrophoresis我還真沒見過真的= =

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